技术背景与原理
胞嘧啶/腺嘌呤碱基编辑依赖 nCas9 将脱氨酶与靶 DNA 并置，可在不产生完整 DSB 的情况下介导 C→T 或 A→G 等转换；这改变了脱靶与安全性评估的假设——需同时关注 DNA 与 RNA 水平的脱氨副反应及 gRNA/非 gRNA 依赖的 DNA 位点。针对 CBE，DETECT-seq（Lei 等，Nat Methods. 2021;18:643–651）在尿嘧啶脱氨基化反应产生的化学可标记中间体上引入富集性化学标签，经全基因组建库与测序还原与脱氨酶—切口酶活动一致的编辑位点，包括 PAM/间隔区依赖及非常规的脱靶模式；这一思路与仅依据 gRNA 同源性作计算机列表的方法互补，是碱基编辑临床前与申报情境下常被引用的全基因组无偏安评策略之一。