提供原核、哺乳动物细胞及酵母多系统重组蛋白表达纯化,minicircle plasmid质粒制备,支持CGT产品早期研发与基础科研。
重组蛋白生产依赖宿主的折叠、修饰与分泌能力:大肠杆菌速度快、成本可控但糖基化与二硫键复杂域受限;CHO/HEK 体系具备哺乳动物糖型与翻译后修饰,适合治疗性蛋白;毕赤等酵母则在高分泌甲醇诱导场景中有大量工艺积累。质粒的纯度、超螺旋与内毒素对细胞转染与动物实验有直接影响。minicircle 等去除细菌骨架的环状形式可减少 CpG 相关免疫刺激并缩小分子量。
与 CGT 研发的关系
病毒包装、RNP 组分和工具酶供应常依赖可放大、可定量的蛋白与质粒工艺。
从基础科研用重组蛋白到IND申报所需质粒原材料,提供多层次技术服务。
大肠杆菌是最成熟的重组蛋白表达系统,成本低、周期短、产量高,适合不需要翻译后修饰的蛋白。通过密码子优化、融合标签筛选(His、GST、MBP、SUMO)和包涵体复性优化提高可溶性表达产率。
哺乳动物细胞表达系统可提供正确的翻译后修饰(糖基化、二硫键等),适合需要天然构象和活性的治疗性蛋白、抗体及复杂受体蛋白。
毕赤酵母(P. pastoris)分泌表达系统可达极高产量,适合分泌蛋白和胞外域蛋白;具备真核翻译后修饰能力,成本显著低于哺乳动物细胞系统。
Minicircle DNA是去除了细菌骨架(原核序列)的微型共价闭合环状DNA,仅保留目的表达盒。与传统质粒相比,可显著降低免疫原性、提高体内转基因表达效率和持续时间。
| 系统 | 翻译后修饰 | 表达量 | 周期 | 适用蛋白类型 |
|---|---|---|---|---|
| E. coli | 无(糖基化) | 高(可达g/L) | 1–2周 | 小蛋白、酶、抗原片段 |
| HEK293T(瞬时) | 哺乳动物型糖基化 | 中(mg/L) | 1–2周 | 分泌蛋白、抗体、受体胞外域 |
| CHO(稳定株) | 哺乳动物型糖基化 | 高(可达g/L) | 2–3月(建株) | 治疗性抗体、融合蛋白 |
| Pichia(分泌) | 高甘露糖型糖基化 | 高(可达g/L) | 2–4周 | 工业酶、部分治疗蛋白 |
| 昆虫细胞(Sf9) | 部分糖基化 | 中高 | 3–4周 | 复杂多亚基蛋白、VLP |
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